Клостридиум дифисиле (Clostridium difficile) GDH/Toxin A§B-количествен

Обща информация:

 C. difficile GDH – антигенен тест

•  CLIA (хемилуминесцентен имуноанализ) за качествено откриване на глутамат дехидрогеназа (GDH) – ензим, произвеждан от всички щамове на C. difficile, включително нетоксигенните.

• GDH се използва като скринингов маркер, тъй като е чувствителен, но не специфичен за токсигенни щамове.

Как работи тестът

• Използва се фекална проба.

• Резултатите се получават бързо и автоматизирано

• Тестът е подходящ за първи етап от диагностичния алгоритъм, след което ако има положителен резултат за GDH от същата проба се прави и тест за токсини A и B.

Предимства

• Висока чувствителност – открива наличието на бактерията, независимо дали произвежда токсини.

• Автоматизация и бързина 

• Част от двустъпков алгоритъм, препоръчан от ESCMID и ACG.

• Какво представлява Clostridium difficile

  • Грам-положителна, анаеробна, спорообразуваща бактерия, част от нормалната чревна микрофлора при около 5% от възрастните.

  • При определени условия (напр. след антибиотично лечение), тя може да се размножи неконтролируемо и да предизвика тежки чревни инфекции.

  • Произвежда токсин A и токсин B, които увреждат чревната лигавица и причиняват възпаление, диария и най-тежкото усложнение е  псевдомембранозен колит

  • Рискови групи

    Най-застрашени от инфекция с C. difficile са:

    • Пациенти, лекувани с антибиотици, особено:

      • Клиндамицин

      • Цефалоспорини

      • Флуорохинолони

    • Хора с дълъг болничен престой – особено в интензивни отделения

    • Възрастни над 65 години

    • Имуносупресирани пациенти – напр. с онкологични заболявания, HIV, след трансплантация

    • Пациенти с хронични заболявания – диабет, бъбречна недостатъчност, сърдечни заболявания

    • След коремни операции или прием на антиациди

    • Бременни жени

    • Хора със синдром на раздразненото черво (IBS)

    • Клинична интерпретация :

    • GDH (- ) проба означава отрицателен резултат (включително липса на клостридии в ГИТ)

    • GDH+ / Tox+ проба означава положителен резултат

    • Какво означава GDH+ / Tox-

      • GDH+: Наличието на  в пробата — GDH се произвежда от всички щамове, включително нетоксигенните.

      • Tox-: Не са открити токсини A и B — това може да означава:

        • Бактерията е нетоксигенна (не причинява болест).

        • Бактерията е токсигенна, но не произвежда токсини в момента.

        • Токсините са деградирали преди анализа (нестабилни са в пробата).

        • Има ниско ниво на токсини, под прага на откриване. Препоръчва се проследяване на пациента, особено при антибиотично лечение или при болничен престой

     

    Не се поставя диагноза само на база GDH+ – необходимо е потвърждение чрез:

    • PCR тест за гени на токсините (tcdA, tcdB) – показва дали щамът е токсигенен. СМДЛ Лаборекспрес предлага PCR Multiplex  Гастроинтестинални инфекции .

    • Клинична оценка – симптоми като водниста диария, коремна болка, левкоцитоза, повишена температурa

    • Ако пациентът няма симптоми се касае за вероятно колонизация и  не доказана инфекция → не се препоръчва лечение.

    • Ако има симптоми на инфекция → вероятно фалшиво отрицателен токсинов тест → нужда от допълнителна диагностика и евентуално лечение.

    • Моля, обърнете внимание на особености на тестовете за C. difficile при деца: 

    • До 70% от новородените и кърмачетата могат да бъдат асимптоматични носители на C. difficile, включително токсигенни щамове.

    • Въпреки наличието на бактерията, те рядко развиват симптоми, защото:

      • Чревните рецептори за токсините са незрели.

      • Има конкуренция с други бактерии в микробиома.

    • При деца над 2–3 години, рискът от симптоматична инфекция се доближава до този при възрастни.

    • При деца са възможни фалшиво положителни резултати:

      • GDH+ / Tox+ при кърмачета може да не означава инфекция, а колонизация.

      • PCR тест за токсин-гени също може да е положителен без клинична значимост.

       

      При деца са възможни фалшиво отрицателни резултати:

      • Токсините са нестабилни и могат да се разрушат при неправилно съхранение на пробата.

      • При ниско ниво на токсини, тестът може да не ги засече.

      • GDH може да е отрицателен при много ниско бактериално натоварване.

       

      • Не се препоръчва рутинно тестване за Clostridium difficile (качествен или количествен) на деца под 12 месеца, дори при диария.

      • При деца над 1 година с персистираща диария, след антибиотично лечение или хоспитализация, тестът може да се използва.

      • Винаги се изисква клинична корелация — НЕ СЕ лекува само по лабораторен резултат !

       

    Предава се:

    • Основно чрез фекално-орален механизъм – заразени повърхности, храна, ръце.

    • Спорите на бактерията са много устойчиви и могат да оцелеят дълго време в околната (болнична) среда.

    • Пробовземане:

    • Фецес в стерилен сух контейнер